O desenho conta a história de um menino de 11 anos chamado Johnny Test, que vive na cidade de Porkbelly. Suas duas irmãs se chamam Susan e Mary Test, elas têm um laboratório onde criam suas experiências para impressionar seu vizinho Gil.
Susan e Mary sempre usam seu irmão Johnny para testar seus inventos, embora elas façam de tudo para impressionar Gil, ele não percebe, mas conhece o irmão delas e é um de seus melhores amigos.
Bling-Bling Boy também é um menino de 11 anos que é apaixonado por Susan, mas ela o odeia. Johny tem um cão chamado Dukey, que pode falar e agir feito um humano, e é o melhor amigo de Johnny, juntos aprontam as maiores confusões para deixar suas irmãs e seus pais irritados.
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